（一）無(wú)菌操作前的準(zhǔn)備工作

培養(yǎng)材料接種時(shí)(shí)的無(wú)菌操作過(guò)程除上述各項(xiàng)操作外，還需完成以下無(wú)菌操作步驟，從而獲得接種的無(wú)菌培養(yǎng)材料。

工作人員無(wú)菌操作前需用肥皂刷洗雙手及手臂，并用流水沖凈，并對(duì)手臂**后穿戴好**工作服、工作帽和口罩，更換拖鞋，才能進(jìn)(jìn)入無(wú)菌操作區(qū)。如進(jìn)(jìn)入層流操作室進(jìn)(jìn)行實(shí)(shí)驗(yàn)操作，應(yīng)完成緩沖準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)的淋浴、一次更換**衣帽、拖鞋；手臂**、二次更換**防護(hù)衣帽、手套、拖鞋等；再在風(fēng)(fēng)淋區(qū)進(jìn)(jìn)行無(wú)菌風(fēng)(fēng)淋后方可進(jìn)(jìn)入層流操作室。進(jìn)(jìn)入無(wú)菌操作區(qū)后，再用70%～75%的酒精擦拭雙手和前臂，完成無(wú)菌操作準(zhǔn)備工作。

用70%～75%酒精擦洗工作臺(tái)面后，將已****的實(shí)(shí)驗(yàn)用品取出，并將操作器械放置在無(wú)菌器械支架上，然后開(kāi)始實(shí)(shí)驗(yàn)操作。在實(shí)(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，對(duì)所有操作器械每次使用后都要進(jìn)(jìn)行**，常采用酒精燈火焰灼燒**。

（二）無(wú)菌操作步驟

準(zhǔn)備工作完成后，對(duì)來(lái)自于自然生長(zhǎng)(cháng)條件下的外植體，按上述培養(yǎng)材料**方法**后取出，放入已**的培養(yǎng)皿中，然后置超凈工作臺(tái)酒精燈火焰下方，用**剪刀等器械進(jìn)(jìn)行適當(dāng)分離、切割或其它處理后備用。

在酒精燈火焰處將培養(yǎng)容器的瓶塞（蓋）輕輕打開(kāi)，瓶口在燈焰處旋轉(zhuǎn)灼燒，用鑷子將培養(yǎng)材料置入培養(yǎng)液上，將鑷子在酒精瓶中浸蘸酒精，置酒精燈上灼燒后放回支架，然后迅速灼燎瓶塞（蓋）數(shù)秒后塞回瓶口。對(duì)繼代培養(yǎng)材料的無(wú)菌操作，需在燈焰處打開(kāi)瓶塞（蓋），繼代材料為液體培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)(shí)直接用**吸管吸取培養(yǎng)細(xì)胞液放入新培養(yǎng)液中；繼代材料為固體培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)(shí)用**鑷子挑取適量材料置新培養(yǎng)液上；繼代材料為其他組織時(shí)(shí)，用**剪刀或其他器械進(jìn)(jìn)行培養(yǎng)材料適當(dāng)切割后，用**鑷子將其置于新培養(yǎng)液上（中），然后迅速灼燎瓶塞（蓋）數(shù)秒后塞回瓶口。